OGM rekòt ekstraksyon & twous anplifikasyon

Espesyalman apwopriye pou ekstraksyon gmo rekòt ak detèjan PCR deteksyon.

Twous la ekstraksyon gmo & anplifikasyon se espesyalman devlope pou deteksyon PCR nan rekòt gmo. Tanpon lize inik ki genyen nan Pati A nan twous la ka espesyalman lize tisi yo nan rekòt prensipal yo - ble, mayi, diri, koton ak plant soya, pou yo lage konpozan ki gen rapò tankou asid nikleyè ak pwoteyin. Ekstraksyon nan fenol / klowofòr konbine avèk RNase a espesifik ka pirifye segondè-pite ADN jenomik ki pa gen okenn enpurte tankou RNA, pwoteyin ak iyon metal. ADN pirifye a ka aplike nan deteksyon PCR ki vin apre. Pati B nan twous la se yon de-eleman senp sistèm reyaksyon PCR ki gen 2 × gmo PCR tanpon ak gmo ADN Polymerase. OGM ADN Polymerase se yon polymère thermostable modifye ak antikò. 2 × gmo PCR pezib la gen eleman divès kalite tankou MgCl2, dNTPs, estabilizasyon reyaksyon PCR, optimiseur ak aktivateur nan yon konsantrasyon nan 2 × gmo. Li te gen avantaj ki genyen nan operasyon vit ak senp, sansiblite segondè, espesifik fò, estabilite bon, elatriye Li ka itilize nan konbinezon ak Pati A pou GMO rekòt transjenik PCR deteksyon.

Chat. Non Anbalaj Size
4992905 200 rxn

 

 


Pwodwi detay

Egzanp eksperimantal

FAQ

Pwodwi Tags

Karakteristik

■ Wide aplikabilite: Twous sa a ka ekstrè kalite ADN jenomik ki soti nan senk pi gwo rekòt gmo.
■ Senp epi rapid: ekstraksyon ADN jenomik gmo ka fini nan 2 èdtan. Pa bezwen gwo santrifujeur frijidè, kondisyon ki ba pou enstriman ak ekipman. Apwopriye pou fè ekstraksyon ADN jenomik rapid nan rekòt gmo nan tout nivo enstitisyon rechèch.
■ Segondè efikasite ak espesifik: Tanpon inik nan antikò-modifye Taq polimeraz la asire anplifikasyon polimeraz efikas, ki pi espesifik pase nòmal Taq polimeraz la.

Aplikasyon

Twous la ka ekstrè kalite ADN jenomik nan pi gwo rekòt gmo tankou ble, mayi, diri, koton ak plant soya, epi fè transjenik deteksyon PCR sou rekòt gmo.

Tout pwodwi yo ka Customized pou ODM / OEM. Pou plis detay,tanpri klike sou Sèvis Customized (ODM / OEM)


  • Previous:
  • Pwochen:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Ekstraksyon ADN jenomik
    Ekstraksyon ADN jenomik te fèt sou 100 mg fèy diri, mayi, plant soya, koton ak ble, respektivman. Eksperyans lan te repete de fwa. 3 μl ADN soti nan total 100 μl elyan yo te chaje pou chak liy.
    Konsantrasyon jèl agarose a te 2%. Elektroforèz la te fèt anba 6 V / cm pou 20 min.
    D15000: TIANGEN D15000 ADN Makè.
    Experimental Example PCR Deteksyon
    Genomic ADN nan diri, mayi, plant soya, koton ak ble yo te anplifye, respektivman. Eksperyans lan te repete de fwa. 6 μl nan total 20 μl sistèm reyaksyon an te chaje pou chak liy.
    Konsantrasyon jèl agarose a te 2%. Elektroforèz la te fèt anba 6 V / cm pou 20 min.
    D15000: TIANGEN D15000 ADN Makè.
    K: Pa gen bann anplifikasyon

    A-1 Modèl

    ■ Modèl la gen enpurte pwoteyin oswa inhibiteur Taq, elatriye ——Pire modèl ADN, retire enpurte pwoteyin oswa ekstrè ADN modèl avèk twous pirifikasyon.

    ■ Denaturasyon modèl la pa konplè ——Ki apwopriye ogmante tanperati denaturasyon ak prolonje tan denaturasyon.

    ■ Degradasyon Modèl —— Re-prepare modèl la.

    A-2 Jadendanfan

    ■ Kalite pòv nan Jadendanfan -— Re-sentetiz Jadendanfan an.

    ■ Primè degradasyon ——Aliquot prime konsantrasyon segondè yo nan ti volim pou prezèvasyon. Evite konjelasyon miltip ak dekonjle oswa alontèm 4 ° C kriokonsèvasyon.

    ■ Konsepsyon move nan prime (egzanp longè Jadendanfan pa ase, dimè ki te fòme ant Jadendanfan, elatriye) -Reba konsepsyon (evite fòmasyon jadendanfan ak estrikti segondè)

    A-3 Mg2+konsantrasyon

    ■ Mg2+ konsantrasyon twò ba ——Byen ogmante Mg2+ konsantrasyon: Optimize Mg la2+ konsantrasyon pa yon seri de reyaksyon soti nan 1 mM a 3 mM ak yon entèval nan 0.5 mM detèmine Mg nan pi bon2+ konsantrasyon pou chak modèl ak Jadendanfan.

    A-4 tanperati rkwit

    ■ Tanperati a wo rkwit afekte obligatwa nan Jadendanfan ak modèl. ——Diminye tanperati a annealing ak optimize kondisyon an ak yon gradyan nan 2 ° C.

    A-5 ekstansyon tan

    ■ Kout tan ekstansyon —— Ogmante tan ekstansyon.

    K: Fo pozitif

    Fenomèn: echantiyon negatif montre tou bann sekans sib yo.

    A-1 Kontaminasyon nan PCR

    ■ Kwa kontaminasyon nan sekans sib oswa pwodwi anplifikasyon —— Ak anpil atansyon pa pipet echantiyon an ki gen sekans sib nan echantiyon negatif la oswa gaye yo soti nan tib la santrifujeur. Reyaktif yo oswa ekipman yo ta dwe otoklave pou elimine asid nikleyè ki deja egziste yo, epi egzistans kontaminasyon yo ta dwe detèmine nan eksperyans kontwòl negatif.

    ■ Kontaminasyon reyaktif ——Aliquot reyaktif yo epi estoke nan tanperati ki ba.

    A-2 Pwemyer

    ■ Mg2+ konsantrasyon twò ba ——Byen ogmante Mg2+ konsantrasyon: Optimize Mg la2+ konsantrasyon pa yon seri de reyaksyon soti nan 1 mM a 3 mM ak yon entèval nan 0.5 mM detèmine Mg nan pi bon2+ konsantrasyon pou chak modèl ak Jadendanfan.

    ■ Move konsepsyon Jadendanfan, ak sekans sib la gen omoloji ak sekans ki pa sib la. —— Re-konsepsyon primè.

    K: anplifikasyon ki pa espesifik

    Fenomèn: Gwoup yo anplifikasyon PCR yo konsistan avèk gwosè a espere, swa gwo oswa piti, oswa pafwa tou de bann anplifikasyon espesifik ak bann anplifikasyon ki pa espesifik rive.

    A-1 Jadendanfan

    ■ Pòv espesifik Jadendanfan

    —— Re-konsepsyon Jadendanfan.

    ■ Konsantrasyon Jadendanfan an twò wo —— Byen ogmante tanperati denaturasyon an epi prolonje tan denaturasyon an.

    A-2 Mg2+ konsantrasyon

    ■ Mg la2+ konsantrasyon twò wo ——Byen diminye konsantrasyon Mg2 +: Optimize Mg la2+ konsantrasyon pa yon seri de reyaksyon soti nan 1 mM a 3 mM ak yon entèval nan 0.5 mM detèmine Mg nan pi bon2+ konsantrasyon pou chak modèl ak Jadendanfan.

    A-3 polimeraz tèrmabl

    ■ Kantite twòp anzim ——Redwi kantite anzim kòmsadwa nan entèval 0.5 U.

    A-4 tanperati rkwit

    ■ Tanperati rkwit la twò ba ——Apropreman ogmante tanperati rkwit la oswa adopte metòd rkwit de-etap la

    A-5 sik PCR

    ■ Twòp sik PCR —— Diminye kantite sik PCR.

    K: Gwoup Mizik oswa smear

    A-1 Jadendanfan——Pòv espesifik ——Re-konsepsyon Jadendanfan a, chanje pozisyon an ak longè Jadendanfan a amelyore espesifik li yo; oswa fè PCR enbrike.

    A-2 Modèl ADN

    —— Modèl la pa pi ——Pirifye modèl la oswa ekstrè ADN avèk twous pirifikasyon.

    A-3 Mg2+ konsantrasyon

    ——Mg2+ konsantrasyon twò wo ——Byen diminye Mg2+ konsantrasyon: Optimize Mg la2+ konsantrasyon pa yon seri de reyaksyon soti nan 1 mM a 3 mM ak yon entèval nan 0.5 mM detèmine Mg nan pi bon2+ konsantrasyon pou chak modèl ak Jadendanfan.

    A-4 dNTP

    —— Konsantrasyon dNTP yo twò wo —— Diminye konsantrasyon dNTP kòmsadwa

    A-5 tanperati rkwit

    ——Tan ba tanperati rkwit ——Apropreman ogmante tanperati rkwit la

    A-6 sik

    ——Twòp sik ——Optimize nimewo sik la

    K: Konbyen ADN modèl yo ta dwe ajoute nan yon sistèm reyaksyon 50 μl PCR?
    ytry
    K: Ki jan yo anplifye fragman long?

    Premye etap la se yo chwazi polimeraz ki apwopriye a. Regilye polimeraz Taq pa ka koreksyon akòz mank de aktivite exonuclease 3'-5 ', ak dezekilib pral redwi anpil efikasite nan ekstansyon nan fragman. Se poutèt sa, regilye Taq polimeraz pa ka efektivman anplifye fragman sib ki pi gran pase 5 kb. Taq polymérase ak modifikasyon espesyal oswa lòt segondè fidelity polymérase yo ta dwe chwazi amelyore efikasite ekstansyon ak satisfè bezwen yo nan anplifikasyon fragman long. Anplis de sa, anplifikasyon nan fragman long mande tou pou ajisteman korespondan nan konsepsyon Jadendanfan, tan denaturasyon, tan ekstansyon, tanpon pH, elatriye Anjeneral, Jadendanfan ak 18-24 bp ka mennen nan pi bon sede. Yo nan lòd yo anpeche domaj modèl, tan an denaturasyon nan 94 ° C yo ta dwe redwi a 30 sec oswa mwens pou chak sik, ak tan nan monte tanperati a 94 ° C anvan anplifikasyon yo ta dwe mwens pase 1 min. Anplis, mete tanperati a ekstansyon nan apeprè 68 ° C ak desine tan an ekstansyon selon pousantaj la 1 kb / min ka asire anplifikasyon efikas nan fragman long.

    K: Ki jan amelyore fidelite a anplifikasyon nan PCR?

    Pousantaj nan erè nan anplifikasyon PCR ka redwi lè l sèvi avèk divès kalite ADN polymerases ak fidelite segondè. Pami tout polimeraz ADN Taq yo jwenn twò lwen, Pfu anzim gen to erè ki pi ba a ak fidelite ki pi wo a (gade tablo ki tache). Anplis de sa nan seleksyon anzim, chèchè yo ka plis redwi pousantaj mitasyon PCR pa optimize kondisyon reyaksyon, ki gen ladan optimize konpozisyon tanpon, konsantrasyon nan polimeraz tèrmostab ak optimize nimewo sik PCR.

    Ekri mesaj ou isit la epi voye li ban nou