Twous RNAclean

A-1 Lysis selil oswa homogenization pa ase

---- Diminye l 'echantiyon, ogmante kantite tanpon lysis, ogmante omojeneizasyon ak tan lysis.

A-2 Echantiyon kantite lajan an twò gwo

---- Diminye kantite echantiyon yo itilize oswa ogmante kantite tanpon lysis.

A-1 Lys selil ensifizan oswa omojeneizasyon

---- Diminye l 'echantiyon, ogmante kantite tanpon lysis, ogmante omojeneizasyon ak tan lysis.

A-2 Echantiyon kantite lajan an twò gwo

---- Tanpri, al gade nan kapasite pwosesis maksimòm lan.

A-3 RNA pa elye konplètman soti nan kolòn nan

---- Apre ou fin ajoute dlo RNase-gratis, kite li pou kèk minit anvan santrifujeur.

A-4 Etanòl nan elyan an

---- Aprè rense l, santrifuje l ankò epi retire tanpon lave a otank posib.

A-5 mwayen kilti selil la pa retire nèt

---- Lè kolekte selil yo, tanpri asire w ke ou retire mwayen kilti a otank posib.

A-6 Selil yo ki estoke nan RNAstore yo pa efektivman santrifuje

---- Dansite RNAstore pi gran pase mwayen kilti selil mwayèn lan; se konsa yo ta dwe ogmante fòs santrifujeur la. Li sijere santrifujeur nan 3000x g.

A-7 Low RNA kontni ak abondans nan echantiyon an

---- Sèvi ak yon echantiyon pozitif pou detèmine si ba-sede a ki te koze pa echantiyon an.

A-1 Materyèl la pa fre

---- Tisi fre yo ta dwe estoke nan nitwojèn likid imedyatman oswa imedyatman mete nan reyaktif la RNAstore asire efè a ekstraksyon.

A-2 Echantiyon kantite lajan an twò gwo

---- Diminye kantite echantiyon an.

A-3 RNase kontaminasyonn

---- Malgre tanpon yo bay nan twous lan pa gen RNase, li fasil pou kontamine RNase pandan pwosesis ekstraksyon e yo ta dwe okipe li avèk swen.

A-4 polisyon elektwoforèz

---- Ranplase tanpon elektwoforèz la epi asire ke consommables yo ak tanpon chaje yo gratis nan kontaminasyon RNase.

A-5 Twòp chaje pou elektwoforèz

---- Diminye kantite echantiyon chaje, chaje chak byen pa dwe depase 2 μg.

A-1 Echantiyon kantite lajan an twò gwo

---- Diminye kantite echantiyon an.

A-2 Gen kèk echantiyon ki gen gwo kontni ADN epi yo ka trete avèk DNase.

---- Fè RNase-gratis tretman DNase jwenn solisyon an RNA, epi yo ka RNA a dirèkteman itilize pou eksperyans ki vin apre apre tretman, oswa yo ka plis pirifye pa twous pirifikasyon RNA.

Pou glasswares, kwit nan 150 ° C pou 4 h. Pou resipyan plastik, benyen nan 0.5 M NaOH pou 10 min, Lè sa a, byen rense l avèk dlo RNase-gratis ak Lè sa a, esterilize konplètman retire RNase. Reyaktif yo oswa solisyon yo itilize nan eksperyans lan, espesyalman dlo, yo dwe gratis nan RNase. Sèvi ak dlo RNase-gratis pou tout preparasyon reyaktif (ajoute dlo nan yon boutèy an vè pwòp, ajoute DEPC nan yon konsantrasyon final la nan 0.1% (V / V), souke lannwit lan ak otoklav).