TGuide Twous ADN jenomik san

A-1 Ba konsantrasyon nan selil oswa viris nan echantiyon an kòmanse —Anrichi konsantrasyon nan selil oswa viris yo.

A-2 Lys ensifizan nan echantiyon yo-echantiyon yo pa te melanje byen avèk pezib la lysis. Li sijere yo byen melanje pa batman kè-toubiyon pou 1-2 fwa. —Li selil ensifizan ki koze pa diminisyon aktivite pwoteyazaz K. —Li selil ensifizan oswa degradasyon pwoteyin akòz ase tan beny cho. Li sijere pou koupe tisi a an ti moso epi pwolonje tan beny lan pou retire tout rezidi ki nan lisat la.

A-3 ensifizan adsorption ADN. -Pa etanòl oswa ba-pousantaj olye pou yo 100% etanòl te ajoute anvan lize a te transfere nan kolòn nan vire.

A-4 Valè pH tanpon elisyon an twò ba. —Ajiste pH la ant 8.0-8.3.

Etanòl rezidyèl nan elyan an.

-Gen rezidyèl tanpon lave PW nan elyan an. Etanòl la ka retire pa santrifujeur kolòn nan vire pou 3-5 min, ak Lè sa a, mete nan tanperati chanm oswa 50 ℃ kouveuz pou 1-2 min.

A-1 Echantiyon an pa fre. -Ekstrè yon ADN echantiyon pozitif kòm kontwòl pou detèmine si ADN ki nan echantiyon an te degrade.

A-2 Move tretman pre-. -Kòz pa fanm k'ap pile likid azòt twòp, imidite reprann, oswa twò gwo kantite echantiyon an.

Tretman yo ta dwe varye pou echantiyon diferan. Pou echantiyon plant, asire w ke ou byen moulen nan nitwojèn likid. Pou echantiyon bèt, omojene oswa byen moulen nan nitwojèn likid. Pou echantiyon ki gen mi selil ki difisil pou kraze, tankou bakteri G + ak ledven, li sijere pou itilize lisozim, lytikaz oswa metòd mekanik pou kraze mi selil yo.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit adopte yon metòd kolòn ki baze sou ki egzije pou klowofòm pou ekstraksyon an. Li espesyalman apwopriye pou echantiyon plant divès kalite, osi byen ke plant sèk poud. Hi-DNAsecure Plant Kit se tou kolòn ki baze sou, men ki pa gen okenn bezwen nan fenol / klowofòm ekstraksyon, fè li san danje epi ki pa toksik. Li apwopriye pou plant ki gen polisakarid segondè ak kontni polifenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System adopte yon metòd likid ki baze sou. Ekstraksyon fenol / kloroform pa nesesè tou. Pwosedi a pou pirifye se senp epi vit ki pa gen okenn limit pou echantiyon an kòmanse kantite lajan, se konsa itilizatè yo ka ajiste kantite lajan an fleksib selon kondisyon yo eksperimantal. Gwo gwosè fragman gDNA ka jwenn ak gwo sede.

ADN jenomik la te ekstrè soti nan komèsan diferan nan echantiyon san imen antye pa TIANamp Twous ADN san. Rezilta yo tankou swiv. Rezilta yo ki nan lis kòm referans sèlman, rezilta yo ekstraksyon aktyèl depann sou kondisyon ki nan echantiyon.

Ekstraksyon ADN boul kay la ka fèt lè l sèvi avèk reyaktif yo bay nan de twous sa yo pa senpleman chanje pwotokòl la nan enstriksyon espesifik pou ekstraksyon ADN boul kay la. Ka kopi a mou nan pwotokòl la ekstraksyon san kaye ADN dwe bay sou mande.

Sispann echantiyon fre a ak 1 ml PBS, saline nòmal oswa tanpon TE. Konplètman omojeneize echantiyon an pa yon homogenizer ak kolekte presipite a nan pati anba a nan yon tib pa santrifujeur. Jete Supernatant la, ak resuspend presipite a ak 200 μl tanpon GA. Pirifikasyon ADN sa a ka fèt selon enstriksyon an.

Pou pirifikasyon gDNA nan plasma, sewòm ak echantiyon likid kò, TIANamp Micro DNA Twous rekòmande. Pou pirifye viris gDNA soti nan echantiyon serom / plasma, TIANamp Viris ADN / RNA Twous rekòmande. Pou pirifye bakteri gDNA nan echantiyon serom ak plasma, TIANamp Bakteri ADN Twous rekòmande (lisozim ta dwe enkli pou bakteri pozitif). Pou echantiyon krache, Twous ADN Hi-Swab ak Twous ADN TIANamp Bakteri yo rekòmande.

Twous Plant DNAsecure oswa Sistèm Plant DNAquick yo rekòmande pou fè ekstraksyon genomis chanpiyon. Pou ekstraksyon genom ledven, TIANamp Leven ADN Twous rekòmande (lyticase yo ta dwe pwòp tèt ou-prepare).